唐紅教授團(tuán)隊揭示HBV rt181T突變的新致病機(jī)制
在HBV已知耐藥位點(diǎn)中，rtA181T是阿德福韋酯、拉米夫定等核苷(酸)類似物共有的耐藥突變。四川大學(xué)華西醫(yī)院感染性疾病中心唐紅教授研究團(tuán)隊近期在Scientific Report雜志上報道了一項關(guān)于比較HBV rt181T/sw172*截斷突變株和HBV rt181T/sw172L替換突變株生物學(xué)特性差異的研究，發(fā)現(xiàn)截短型HBsAg和替換型HBsAg對HBV的復(fù)制具有不同的調(diào)節(jié)作用。
慢性乙型肝炎治療的關(guān)鍵是抗病毒治療。但隨著核苷(酸)類似物抗病毒療程的延長，乙肝病毒(HBV)耐藥突變逐漸增多。HBV發(fā)生耐藥突變后不僅可使抗病毒藥物的療效降低，亦可引起病毒自身生物學(xué)特性發(fā)生變化并影響其致病性，有的耐藥突變株甚至有可能增加肝細(xì)胞肝癌(HCC)發(fā)生的風(fēng)險。在HBV已知耐藥位點(diǎn)中，rtA181T是阿德福韋酯、拉米夫定等核苷(酸)類似物共有的耐藥突變，但到目前為止HBV rtA181T突變的生物學(xué)和臨床意義尚未完全闡明。
HBV rt A181T耐藥突變系聚合酶RT區(qū)181位編碼丙氨酸(A)的密碼子變?yōu)榫幋a蘇氨酸(T)的密碼子。目前臨床發(fā)現(xiàn)，該RT區(qū)有兩種核苷酸的突變模式可導(dǎo)致rtA181T變異(CTG GCN→CTG ACN和CTG GCN→ CTT ACN);但反映到重疊的S基因上，前者可引起S區(qū)172位編碼色氨酸(W)的密碼子變?yōu)榻K止密碼子(TGG CTC→TGA CTC)，而后者則可引起編碼色氨酸(W)的密碼子變?yōu)榫幋a亮氨酸(L)的密碼子(TGG CTC→TTA CTC)，從而導(dǎo)致sW172*或sW172L突變的產(chǎn)生。sW172*突變可導(dǎo)致HBsAg丟失大部分C-末端疏水區(qū)，產(chǎn)生C端截短體從而形成截短型HBsAg，而sW172L突變則產(chǎn)生全長的替換突變型HBsAg。
該研究利用HBV體外細(xì)胞復(fù)制體系和體內(nèi)復(fù)制小鼠模型，通過構(gòu)建攜帶HBsAg截短和替換突變的復(fù)制型HBV重組質(zhì)粒，觀察HBsAg截短或替換突變對HBV轉(zhuǎn)錄復(fù)制的不同作用。
結(jié)果顯示，HBV rt181T/sw172*截短突變株和HBV rt181T/sw172L替換突變株在體外細(xì)胞模型中的復(fù)制水平較野生株均有輕微降低;但相對于HBV rt181T/sw172L替換突變株，HBV rt181T/sw172*截短突變株轉(zhuǎn)染的細(xì)胞上清中HBsAg和HBV DNA水平均明顯降低。
然而在體內(nèi)動物實(shí)驗中，相對于野生型HBV和HBV rt181T/sw172L替換突變株，HBV rt181T/sw172*截短突變株轉(zhuǎn)染的小鼠肝組織內(nèi)HBV DNA復(fù)制水平明顯增加且復(fù)制持續(xù)時間顯著延長，HBsAg和HBcAg在肝細(xì)胞內(nèi)的蓄積或表達(dá)亦明顯增加;而HBV rt181T/sw172L替換突變株轉(zhuǎn)染的小鼠肝組織內(nèi)HBV DNA復(fù)制水平較野生株無明顯改變，HBsAg和HBcAg在肝細(xì)胞內(nèi)表達(dá)亦無明顯增加。
該研究結(jié)果揭示了HBV rt181T/sw172突變株表達(dá)的截短型HBsAg和替換型HBsAg對HBV生物學(xué)特性改變具有不同的調(diào)節(jié)作用，即截短型HBsAg可增強(qiáng)HBV復(fù)制并在肝細(xì)胞內(nèi)明顯蓄積，而替換型HBsAg則不具有該作用。因HBV rt181T/sw172*和HBV rt181T/sw172L突變株生物學(xué)特性存在較大差異，因此對于臨床報告的HBV rt181T耐藥突變有必要進(jìn)一步區(qū)分是表達(dá)截斷型HBsAg還是替換型HBsAg。由于HBV rtAl81T突變所產(chǎn)生的HBsAg截短蛋白在改變HBV生物學(xué)特性和致病性中可能扮演重要角色，進(jìn)一步闡明HBV rtAl81T/sWl72*耐藥突變株在增強(qiáng)基因轉(zhuǎn)錄復(fù)制中的確切分子機(jī)制，將有助于闡明耐藥突變株致病機(jī)制的變化，對臨床HBV相關(guān)疾病的防治工作無疑具有重要的理論和實(shí)際意義。
團(tuán)隊介紹：
唐紅教授系國家杰出青年基金獲得者，博士生導(dǎo)師，現(xiàn)任四川大學(xué)華西醫(yī)院感染性疾病中心主任，生物治療國家重點(diǎn)實(shí)驗室感染性疾病研究室主任，中華醫(yī)學(xué)會感染病學(xué)分會副主任委員，中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會常委，四川省醫(yī)學(xué)會感染病專委會主任委員，四川省醫(yī)學(xué)會肝病專委會候任主任委員。
唐紅教授研究團(tuán)隊長期從事肝炎病毒分子生物學(xué)、病毒性肝炎及相關(guān)肝病的分子致病機(jī)理和臨床優(yōu)化治療研究工作，研究領(lǐng)域主要涉及宿主轉(zhuǎn)錄因子對HBV基因組轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的調(diào)控;建立了一個新的HBV復(fù)制體系，從肝富集轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控肝特異性轉(zhuǎn)錄復(fù)制這一新的角度闡明了HBV的嗜肝機(jī)理;對HBV轉(zhuǎn)錄與復(fù)制調(diào)控在HBV 變異株產(chǎn)生中的作用和機(jī)理及在重癥乙肝發(fā)生中的作用、HBx在HBV轉(zhuǎn)錄與復(fù)制中的作用及分子機(jī)理、核苷(酸)類似物和干擾素抗HBV作用和耐藥機(jī)理、慢性乙肝抗病毒優(yōu)化治療策略等，也進(jìn)行了一系列具有創(chuàng)新性的研究工作。
研究團(tuán)隊先后承擔(dān)了包括國家杰出青年科學(xué)基金、“863”課題、“973”分課題、““十一五“和”十二五“傳染病重大專項課題和國家自然科學(xué)基金課題在內(nèi)的課題二十余項，抗感染藥物多中心臨床研究課題三十余項。發(fā)表論文及綜述二百余篇，其中SCI論文一百余篇。曾先后獲四川省科技進(jìn)步一、二、三等獎各1項，中華醫(yī)學(xué)科技獎三等獎1項。
